1. 样品QC
2. 从总RNA中分离mRNA(原始文库将采用至少2 µg mRNA进行构建)
3. 以带有NotI酶切位点的oligo(dT)Linker Primer为反转录引物,再在双链cDNA的5’端加SalII adaptor
4. NotI酶切、过柱去除小片段
5. 将合成的双链cDNA与载体进行连接,连接产物转化DH10B感受态细胞
6. cDNA文库的QC:检测库容量(重组子克隆数目);随机挑取30个克隆子进行PCR鉴定和双向测序分析,检测含插入片段的克隆子比例,检测平均插入片段大小
客户提供
注明样品的种属,收集样品后,应将样品立即置于干冰保持低温运输。
我们提供
含有文库的甘油菌和质量分析鉴定报告
质量保证
文库含有至少4 x 106个原始克隆
有超过85%的载体含有插入片段