细胞培养是生命科学研究中常用的实验手段。不像其它常用的实验方法,细胞培养是一个动态的连续过程,细胞通常会对操作失误或污染物有所反应,这些反应往往表现出不正常的细胞状态或培养基外观。如果受到支原体污染时,细胞形态较之无明显变化,极易被忽视,往往直到污染非常严重时才能发现。受污染的细胞膜上可能有几百个支原体,这些支原体竞争营养并释放有毒的代谢产物,严重影响实验结果。
研究表明,至少二十多种支原体能污染细胞,其中zui常见的有:口腔支原体(M.orale)、精氨酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)、发酵支原体(M. fermentans)、人型支原体(M. hominis)、唾液支原体(M.salivarium)、肺支原体(M.pulmonis)和梨支原体(M.pirum)等。培养细胞的支原体污染率在4%-92%不等,其污染来源包括工作环境、操作者本身(一些支原体是人体的正常菌群)、培养基、血清、细胞交叉污染、实验器材和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。
确认细胞培养过程中出现问题的潜在原因是一项困难且耗时的任务,在细胞培养中,任何突然的变化都应该被怀疑,同时良好的试验规范和定期检测支原体污染也十分必要。支原体检测的方法有很多种,如直接培养、DNA荧光染色、ELISA和PCR法等。
支原体是一类能够自我复制的zui小的原核生物,可透过一般过滤膜且对抗生素有耐药性,是原代细胞和传代细胞的常见污染物,严重影响细胞的生长,形态和代谢。
Mycoplasma Detection Kit 支原体PCR检测试剂盒,能够快速、准确地检测细胞培养中的支原体污染。试剂盒中的 Primers 是依据支原体基因组中高度保守的 16SrRNA 编码域而设计的,只需简单的 PCR 反应就可检测 M.Arginini, M.Fermentans, M.Hyorhinis, M.Orale, M.Salivarium, M. Hominis, M.Pneumonia 等常见的支原体。
全套检测试剂
-支原体PCR检测试剂盒中包含支原体检测的全套试剂,方便使用
操作方法简便
-只需简单 PCR 就可以检测常见的7大类支原体
样本容易制备
-细胞培养上清液即可作为 PCR 反应模板
结果分析直观
-通过常规电泳就可以分析细胞是否被支原体污染
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