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产品名称:

RACE服务

产品价格:
厂商性质: 工程商 产品时间: 2020-11-09
获得cDNA的完整序列对研究基因结构、蛋白质表达、基因功能至关重要。RACE法是通过PCR技术实现的,无须建立cDNA文库,可以在很短的时间内获得有价值的信息。
 服务流程

       1)       总RNA提取

 

       2)       已知序列的验证:根据客户提供的已知序列设计引物,以总RNA为模板进行RT-PCR扩增,验证参考序列的存在及方向。

 

       3)       5’和3’RACE

               a)       RNA的去磷酸化处理

 

               b)       RNA的3’末端处理;RNA的5’末端处理

 

               c)       cDNA的合成

 

               d)       5’和3’RACE的PCR反应

 

               e)       PCR产物构建TA克隆

 

               f)       分别随机挑取10个克隆进行测序

 

       4)       对获取的序列进行验证以验证获取的5' RACE或3' RACE序列与已知序列是否连续存在于同一条cDNA片段上。

 

客户提供

 

         总RNA量大于10 mg,如果基因的丰度较低或者未知序列较长,请提供尽量多的实验材料。

 

         已知的参考序列长度≥200 bp。

 

我们提供

 

         构建好5’和3’RACE的TA克隆(含20%甘油的LB培养基),装到PMD18-T载体上;测序图谱;实验报告

 

质量保证

 

         获取的5' RACE或3' RACE序列与已知序列连续存在于同一条cDNA片段上

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