MicroRNA前体表达克隆真核细胞转录形成的非编码单链小分子RNA。它们的序列高度保守,通常是21到23个核苷酸长度,几乎与所有的细胞功能和基因表达调控有关。它们通过靶定到mRNA3'非翻译区(3'UTR)来调节基因的表达。MicroRNA靶标基因的表达失调与癌症、心血管疾病等各种疾病的发生有关。 它是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,它们在动植物中参与转录后基因表达调控。microRNA的表达、抑制或过表达对于研究基因功能有重要的意义。重组腺病毒是进行基因转移和表达的工具,功能强大且易于操作。腺病毒*的生物学特征使它成为“载体的shou选”,被科研工作者广泛应用。
MicroRNA前体表达克隆有以下几点性能优势:
1、覆盖面广
涵盖了miRBase最新数据库中几乎所有已知人、小鼠和大鼠miRNA;
2、灵活的载体选择
慢病毒载体可转导普通细胞和难转染、未分化细胞;
非病毒载体可进行稳定或瞬时转染;
3、优化的表达框
miRNA表达框已*测序确证并经过优化,有利于前体miRNA在细胞中的表达和成熟;
4、可选标记和报告基因
载体中包含的eGFP标签可以监测转染或转导效率;
新霉素和嘌呤霉素标记可用于稳定细胞株的筛选。