昆虫杆状病毒技术服务采用目宿银纹夜蛾杆状病毒(AcNPV)作为表达载体。昆虫杆状病毒表达载体是一种辅助性依赖,它仅有质粒载体不能表达外源基因,还需野生型杆状病毒辅助,形成整合有外源基因的重组型杆状病毒才能完成外源基因的表达的真核DNA表达载体。 由于该系统所需要的周期远比动物或植物系统短,可以利用昆虫个体或其培养细胞进行大规模的表达生产,生产的重组蛋白产量高,蛋白翻译后加工比细菌、酵母生产系统完善,而且由于昆虫杆状病毒具有限制性的宿主范围,只对特定种属的昆虫及其细胞进行感染,对人畜等脊椎动物没有感染能力,因此具有比在哺乳动物及其培养细胞生产系统更为安全等优点而成为目前*的真核表达系统之一。
昆虫杆状病毒技术服务的技术特点:
1.重组蛋白表达水平高(最高可达细胞总蛋白的50%),大多数为有生物功能的可溶性蛋白;
2.真核表达系统,重组蛋白生物学活性高,能同时表达多个外源基因;
3.可进行翻译后修饰:磷酸化修饰,形成正确折叠的二硫键,进行N-和O-型糖基化修饰
4.表达人源化蛋白,昆虫细胞中糖基化途径克服人源糖蛋白的问题。
5.大多数昆虫细胞系在不加血清培养基中快速生长,得到高滴度病毒和高产量重组蛋白;
6.相对于其他真核表达系统成本较低,硬件设施成本低接近于原核表达,无需CO2培养箱,无需血清培养基;
7.规模化培养简单经济,适合自动化生产,昆虫细胞比哺乳动物细胞操作简单;
8.商业化的BEVS系统让病毒重组及蛋白表达变得更简单。